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实验室超滤分离产品选择,如何选择超滤管和超滤膜

如何选择超滤产品

        赛多利斯提供了可满足各种超滤要求的膜,选择超滤膜主要根据膜的材质,截留分子量以及综合性能等,但是应注意,膜的最终性能还取决于所需进行超滤的溶液的特性,建议采用不同的膜进行实验,以选出最适合的膜。

不同材质超滤膜的特点

聚醚砜

(Polyethersulfone)

这是一种用于常规目的的滤膜,尤其在回收大分子截留物时,可以得到极好的收率。聚醚砜具有较高的化学和热稳定性,通量大,流速快,耐碱能力强(pH范围1 ~ 14)

三醋酸纤维素

(Cellulose Triacetate)

也是一种高度亲水的膜,对蛋白的吸附极低,用于从低蛋白浓度的稀释液中回收蛋白时,可以得到极高的收率。再生纤维素可以高压灭菌,容易清洗,耐酸碱性能及耐溶剂性能好

再生纤维素

(Regenerated Cellulose)

这种膜亲水性强,非特异性吸附极低,溶剂和小分子溶质在滤过时不会因被膜吸附而产生损失,因此在样品清洗、除蛋白以及其它需要回收滤过液的操作中,建议使用

Hydrosart

(Hydrosart)

Hydrosart超滤膜是赛多利斯的专利产品,它的基本特性与再生纤维素类似,具有极低的蛋白吸附特性的同时,又具有高流速和高通量的特性,是免疫球蛋白浓缩和脱盐的理想用膜

不同材质及截留分子量(MWCO)的超滤膜性能比较

超滤膜

相对流速(ml/min/cm2)

性能特点

聚醚砜,pH范围1 ~ 14

3,000 MWCO

0.05

肽的回收率高

5,000 MWCO

0.24

肽的回收率高,流速较快

10,000 MWCO

0.41

应用范围广,流速快,吸附低

30,000 MWCO

0.41

应用范围广,流速快

50,000 MWCO

0.45

精确的截留分子量限

100,000 MWCO

0.35

免疫球蛋白的收率高

三醋酸纤维素,pH范围4 ~ 8

5,000 MWCO

0.04

去除肽和蛋白

10,000 MWCO

0.11

微小组分,游离/结合药物研究

20,000 MWCO

0.58

样品清洗,HPLC样品制备

再生纤维素,pH范围3 ~ 11

10,000 MWCO

0.18

微克量蛋白质的高效回收

30,000 MWCO

0.58

免疫球蛋白的快速和高效回收

100,000 MWCO

0.40

蛋白质梯度分离

HydrosartpH范围3 ~ 11

5,000 MWCO

0.14

稀释液的高效回收

10,000 MWCO

0.27

流速快,收率高,吸附低

30,000 MWCO

0.48

免疫球蛋白的收率高

*. 0.25mg/ml牛血清(BSA)或免疫球蛋白(IgG),在4 bar压力下,透过相应MWCO膜所测得的流速

不同截留分子量(MWCO)的超滤膜选择指南

应用/分子量

<5,000

10,000

30,000

50,000

100,000

>300,000

细菌

X

X

DNA片段

X

X

X

X

X

X

生长因子

X

X

免疫球蛋白

X

X

X

核酸

X

X

X

X

X

单克隆抗体

X

X

X

寡聚核苷酸

X

X

病毒

X

X

X

酵母菌

X

X

. 为了得到最高的收率,所选滤膜的MWCO要小于或等于所需截留分子大小的一半

赛多利斯的Vivascience系列超滤产品,采用了先进设计和低吸附材质,同时具有超滤速度快和收率高的优点,当超滤器的大小和膜的截留分子量选择适当时,回收浓度大于0.1mg/ml的溶质,收率可达90%以上。大部分样品损失是由于滤膜表面和样品容器的非特异性吸附引起的。

滤膜吸附

滤膜表面样品的吸附量,与样品的性质以及所选用的滤膜材质有关,一般为2~10μg/cm2。如果研究的对象是滤过液,由于其滤过时要穿过滤膜的整个内部结构,所以吸附量相对较大,为20~100μg/cm2。通常截留分子量高的膜吸附较高,而截留分子量低的膜吸附较低。

容器吸附

生产超滤器时,通过选用低吸附材质,精细抛光,已最大限度地降低了吸附性,但仍有一些溶质会被容器内壁吸附。与滤膜吸附相比,这种吸附的比例很小,但当容器内壁的表面积相对较大时,也可能成为产品损失的主要原因。

如何提高收率

当需要较高的收率时,尤其当研究的样品对象在微克范围时,建议应考虑以下几点:


根据样品处理量,选择最小可用的超滤容器,可以充分利用Vivascience产品滤过速度快的优势,在小容器中反复添加样品,反复超滤

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在适量范围内,选截留分子量最低的超滤膜

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如可能,使用水平转头代替角转头离心,这样可减少在离心过程中溶液与离心管接触的表面积

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将压力或离心力降低到大约最大推荐数值的一半

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避免过度浓缩,最终体积越小,越难得到完全回收,如可能,在第一次回收后,用一滴或多滴缓冲液润洗容器,然后再次回收

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用溶于蒸馏水中的5%SDS、Tween 20或Triton X预先浸泡超滤容器过夜,然后在使用前彻底润洗

 超滤产品链接:

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